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大鼠膿毒癥模型

更新時(shí)間:2025-04-09

簡要描述:

膿毒癥(Sepsis)是嚴(yán)重感染、嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、休克、后常見的并發(fā)癥,可導(dǎo)致膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征(MODS)。已成為臨床危重病患者的重要死亡原因之一。全球每年膿毒癥患病人數(shù)超過1900萬,其中有600萬患者死亡,病死率超1/4,存活的患者中約300萬人存在認(rèn)知功能障礙。

大鼠膿毒癥模型是膿毒癥研究中的重要工具,借此模型的研究成果有望指導(dǎo)臨床,提高治療水平

大鼠膿毒癥模型是膿毒癥研究中的重要工具,借此模型的研究成果有望指導(dǎo)臨床,提高治療水平。

大鼠膿毒癥模型SOP

背景:盲腸結(jié)扎穿孔模型(CLP)模型是接近于人類膿毒癥機(jī)制的模型,被稱為膿毒癥模型的“金標(biāo)準(zhǔn)"。CLP 技術(shù)在20世紀(jì)70年代被建立。CLP 模型非常適宜用于防治膿毒癥或膿毒性休克新藥的臨床前觀察。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:

品系:SD大鼠;性別:雄性;周齡:6-8周;體重:180-220g。

操作流程:

1動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)7天;

2盲腸結(jié)扎穿刺(Cecal ligation and puncture, CLP)建立膿毒癥大鼠模型:麻醉 ,做腹部正中切口尋找盲腸,分離腸系膜后在盲腸中點(diǎn)結(jié)扎,后在結(jié)扎位置至盲腸遠(yuǎn)端的中點(diǎn)用 20G針做貫通穿刺,擠出少許糞便置于盲腸表面,將盲腸回納腹腔并關(guān)腹。皮下注射鎮(zhèn)痛藥并放回籠中。

模型嚴(yán)重程度

盲腸結(jié)扎位置是CLP模型中死亡率和疾病嚴(yán)重程度的最主要決定因素。結(jié)論為:① 低位CLP或以下的死亡率幾乎為零,為輕度膿毒癥;② 中位CLP50%60%)的術(shù)后死亡率為30%,為中度膿毒癥;③ 高位CLP75%)的大鼠在術(shù)后7d內(nèi)全部死亡,為重度膿毒癥。而在不同程度膿毒癥中,死亡主要集中在最初的48 h內(nèi)。

模型評(píng)估

1. 觀察大鼠的行為和生理反應(yīng): 外觀自主意識(shí) 、自主活動(dòng)、  對(duì)外界刺激的反應(yīng)、 眼睛是否有分泌物、 呼吸頻率和質(zhì)量、etc..;

2. 全血的菌落總數(shù)的單位CFU(Colony-Forming Units,菌落形成單位); 

3. 血清指標(biāo) 在手術(shù)后的0-72小時(shí)內(nèi),可以檢測血液相關(guān)反映炎癥水平和臟器損傷情況: 天冬氨酸轉(zhuǎn)移酶(AST) Bing氨酸轉(zhuǎn)移酶(ALT) 、肌酸激酶(CK)、 乳酸脫氫酶(LDH) 、血肌酐(CR)、血尿素氮(BUN)  TNF-α、IL-6etc.[1,2,3];

4. 組織病理損傷檢測 通過肺、肝、腎組織石蠟切片進(jìn)行糖原/HE.染色,可以觀察組織病理損傷的情況。例如,盲腸結(jié)扎穿刺法構(gòu)建的膿毒血癥大鼠模型會(huì)發(fā)現(xiàn)腎小管上皮細(xì)胞膨脹、刷狀緣缺失、空泡變性、壞死、管型形成和細(xì)胞脫落等病理改變[1,2,3]

多方面的指標(biāo)檢測有助于評(píng)估膿毒癥大鼠的病理生理狀態(tài)、嚴(yán)重程度和模型的有效性。

1.Mitchell PS, Parkin RK, Kroh EM, Fritz BR, Wyman SK, Tewari M et al.Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection. Proc Natl Acad Sci. 2008; 105: 10513-8.

2. Xiao B, Wang Y, Li W, Baker M, Guo J, He YW. Plasma microRNA signature

as a non-invasive biomarker for acute graft-versus-host disease. Blood. 2013;

122: 3365.

3. Yamaguchi T, Izumi Y, Nakamura Y, Yamazaki T, Shiota M, Iwao H. Repeated remote ischemic conditioning attenuates left ventricular remodeling via exosome-mediated intercellular communication on chronic heart failure after myocardial infarction. Int J Cardiol. 2015; 178: 239-46

 

 


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